{"id":9396,"date":"2015-05-22T17:18:33","date_gmt":"2015-05-22T15:18:33","guid":{"rendered":"http:\/\/www.bmscience.net\/blog\/?p=9396"},"modified":"2024-03-04T17:29:24","modified_gmt":"2024-03-04T16:29:24","slug":"principi-generali-della-cromatografia-e-lesperimento-fondamentale","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.bmscience.net\/blog\/principi-generali-della-cromatografia-e-lesperimento-fondamentale\/","title":{"rendered":"Principi generali della cromatografia e l&#8217;esperimento fondamentale"},"content":{"rendered":"\n<p>La cromatografia \u00e8 una tecnica analitica che consente di separare le componenti di una miscela omogenea (liquida o gassosa) sfruttando la&nbsp;<strong>diversa affinit\u00e0<\/strong> delle molecole o degli ioni di due diverse fasi:<\/p>\n\n\n\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>la&nbsp;<strong>fase fissa<\/strong>, chiamata anche fase stazionaria perch\u00e9 viene immobilizzata.<\/li>\n\n\n\n<li>la&nbsp;<strong>fase mobile<\/strong>, chiamata anche eluente, che viene fatta scorrere in modo continuo nella fase stazionaria.<\/li>\n<\/ul>\n\n\n<div class=\"wp-block-image\">\n<figure class=\"alignright is-resized\"><a href=\"http:\/\/www.bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2015\/05\/Mikhail_Tsvet.jpg\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" width=\"541\" height=\"667\" src=\"http:\/\/www.bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2015\/05\/Mikhail_Tsvet.jpg\" alt=\"Mikhail_Tsvet\" class=\"wp-image-9397\" style=\"width:288px;height:auto\" srcset=\"https:\/\/www.bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2015\/05\/Mikhail_Tsvet.jpg 541w, https:\/\/www.bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2015\/05\/Mikhail_Tsvet-243x300.jpg 243w\" sizes=\"auto, (max-width: 541px) 100vw, 541px\" \/><\/a><\/figure>\n<\/div>\n\n\n<p>L&#8217;inventore della cromatografia fu il botanico italo-russo M.S. <strong>Tswett<\/strong>, il quale ipotizzo che la separazione cromatografica dipendeva dal diverso <strong>grado di adsorbimento<\/strong> di ciascuna sostanza nella fase stazionaria: le sostanze pi\u00f9 affini alla fase stazionaria spostano quelle meno affini ad essa.<br>Attualmente la separazione \u00e8 dovuta alla diversa affinit\u00e0 delle sostanze verso le due fasi: pi\u00f9 una sostanza \u00e8 affine alla fase stazionaria, pi\u00f9 a lungo \u00e8 trattenuta e il suo scorrimento viene rallentato.<\/p>\n\n\n\n<p>La maggior parte delle tecniche cromatografiche si ispirano ad un unico esperimento fondamentale, quello di Tswett:<\/p>\n\n\n\n<ol class=\"wp-block-list\">\n<li>Si impacca in una colonna la fase stazionaria;<\/li>\n\n\n\n<li>La miscela da separare viene depositata in testa alla colonna che poi deve essere riempita&nbsp;con la fase mobile in modo tale che tutta la colonna sia piena;<\/li>\n\n\n\n<li>Si aggiunge in modo continuo la fase mobile, affinch\u00e9, scorrendo attraverso la fase stazionaria, trascini con s\u00e9 i diversi componenti della miscela in base alle diverse affinit\u00e0 con le due fasi;<\/li>\n\n\n\n<li>Si raccolgono le frazioni di volume noto in una serie di recipienti;<\/li>\n\n\n\n<li>Al termine della separazione cromatografica si avranno le componenti della miscela in diversi contenitori e si pu\u00f2 tracciare un istogramma in cui sull&#8217;ordinata compare la massa e sulle ascisse il <strong>volume di ritenzione<\/strong> (<strong>V<sub>R<\/sub><\/strong>). Il volume di ritenzione \u00e8 il volume necessario per far uscire completamente tutti i componenti della miscela.<br>La massa o concentrazione la si pu\u00f2 ottenere pesando i recipienti dopo aver fatto evaporare l&#8217;eluente, oppure&nbsp;tramite un esame in assorbimento, se le sostanze colorano la soluzione.<\/li>\n<\/ol>\n\n\n\n<p>Le sostanze della miscela sono coinvolte, durante l&#8217;eluizione, in un&nbsp;<strong>processo dinamico<\/strong>&nbsp;di trasferimento in cui c&#8217;\u00e8 un equilibrio fisico tra la fase fissa e la fase mobile. Questo meccanismo di estrazione-trascinamento-estrazione, consente la separazione delle sostanze secondo l&#8217;affinit\u00e0 di ciascuna per le due fasi.<\/p>\n\n\n\n<p>Le interazioni coinvolte tra la sostanza da separare e le due fasi sono per lo pi\u00f9 <strong>interazioni deboli<\/strong> (legami a idrogeno, dipolo-dipolo, dipolo-dipolo indotto e forze di Van der Waals). In tutte queste interazioni la polarit\u00e0 delle due fasi svolge un ruolo decisivo.<\/p>\n\n\n\n<blockquote class=\"wp-block-quote is-layout-flow wp-block-quote-is-layout-flow\">\n<p class=\"has-text-align-left\">Immagine: &#8220;<a href=\"https:\/\/commons.wikimedia.org\/wiki\/File:Cromatografia_su_colonna.jpg#\/media\/File:Cromatografia_su_colonna.jpg\">Cromatografia su colonna<\/a>&#8221; di Alexiots A. Zlatich &#8211; Opera propria.<br>Con licenza CC BY-SA 3.0 tramite Wikimedia Commons<\/p>\n<\/blockquote>\n\n\n<div id=\"bmscience1081631992\" style=\"margin-left: auto;margin-right: auto;text-align: center;\"><script async src=\"\/\/pagead2.googlesyndication.com\/pagead\/js\/adsbygoogle.js?client=ca-pub-3495866718878812\" crossorigin=\"anonymous\"><\/script><ins class=\"adsbygoogle\" style=\"display:block;\" data-ad-client=\"ca-pub-3495866718878812\" \ndata-ad-slot=\"4682122636\" \ndata-ad-format=\"auto\" data-full-width-responsive=\"true\"><\/ins>\n<script> \n(adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({}); \n<\/script>\n<\/div>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>La cromatografia \u00e8 una tecnica analitica che consente di separare le componenti di una miscela omogenea (liquida o gassosa) sfruttando la&nbsp;diversa affinit\u00e0 delle molecole o degli ioni di due diverse fasi: L&#8217;inventore della cromatografia fu il botanico italo-russo M.S. 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fondamentale<\/span><\/a><\/p>\n","protected":false},"author":4,"featured_media":9398,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"advgb_blocks_editor_width":"","advgb_blocks_columns_visual_guide":"","footnotes":""},"categories":[50],"tags":[2092,2679,3070,3072,3074,4891,4893,5990,7683,8053],"class_list":["post-9396","post","type-post","status-publish","format-standard","has-post-thumbnail","hentry","category-chimica-analitica","tag-cromatografia","tag-eluente","tag-fase-fissa","tag-fase-mobile","tag-fase-stazionaria","tag-miscela","tag-miscela-omogeneae","tag-processo-dinamico","tag-tswett","tag-volume-di-ritenzione","entry"],"author_meta":{"display_name":"Raffo Coco","author_link":"https:\/\/www.bmscience.net\/blog\/author\/raffo\/"},"featured_img":"https:\/\/www.bmscience.net\/blog\/wp-content\/uploads\/2015\/05\/Cromatografia_su_colonna-300x198.jpg","coauthors":[],"tax_additional":{"categories":{"linked":["<a 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